蛋白质分子量测定的基本原理是通过物理方法量化蛋白质分子的质量。质谱技术尤其是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）作为一种高效的蛋白质分子量测定手段，凭借其高灵敏度和准确度，已成为蛋白质研究领域中不可或缺的工具。分子量不仅反映了蛋白质的大小和复杂程度，还对后续的蛋白质分析、功能研究及生物制品的开发具有指导意义。准确的蛋白质分子量测定可以为科研人员提供关键的分子信息，从而推动生物医药领域的创新和进步。百泰派克生物科技在下文为你介绍蛋白质分子量测定服务：关键方法、技术及应用。

一、蛋白质分子量测定的技术方法

1、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）

MALDI-TOF-MS是现代蛋白质分子量测定中最常用的一种技术，其优势在于高灵敏度、快速分析以及样品消耗少。该技术采用激光将蛋白质样品与基质共同结晶，通过激光照射使基质吸收能量，进而使蛋白质分子电离。电离后的蛋白质离子在飞行管道中加速，飞行时间与离子的质荷比（M/Z）成正比，从而准确测定分子量。

（1）优势

• 高灵敏度，适用于低浓度样品
• 高准确度，分子量测定误差可低至0.01%
• 快速分析，适用于高通量样品筛选
• 样品需求量少（约10-50μg）

（2）应用领域

• 蛋白质鉴定和纯度分析
• 多肽、蛋白质复合物及二聚体的检测
• 高通量的生物分子量测定

2、静电场凝胶电泳（SDS-PAGE）

SDS-PAGE通过分子量不同的蛋白质在凝胶中的迁移速率差异实现分离。在分子量测定中，SDS-PAGE依赖于蛋白质分子的电荷与大小的关系来进行分子量推测。尽管此方法广泛使用，但其分辨率较低，且对于高分子量蛋白质的分离效果不理想。

（1）优势：

• 实验操作简便，广泛应用于基础实验室
• 能够同时分析多个样品

（2）不足：

• 不能直接测量分子量，需与标准蛋白质对照
• 分辨率较差，对于复杂样品无法提供精确的分子量数据

液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）将蛋白质样品通过液相色谱分离后，通过质谱分析其分子量。这种方法的优势在于高效分离与精确分析，能够处理复杂的蛋白质混合物。LC-MS适用于需要深入分析复杂样品的研究，能够获得更加详细的蛋白质分子信息。

（1）优势：

• 高效分离蛋白质混合物，适合复杂样品分析
• 通过质谱准确测量分子量及蛋白质组分

（2）不足：

• 操作复杂，需要较高的技术水平
• 需要较高的样品纯度和准备要求

二、蛋白质分子量测定服务的应用

蛋白质的分子量是研究其结构和功能的重要基础。在蛋白质组学研究中，通过蛋白质分子量测定可以帮助鉴定目标蛋白，进而分析其结构与功能的关系。例如，通过对未知蛋白质进行分子量测定，结合数据库匹配，可以初步推测该蛋白的功能和可能的生物学作用。

在制备和生产蛋白质药物或试剂的过程中，确保蛋白质样品的纯度至关重要。通过蛋白质分子量测定，科研人员可以直观地评估样品的纯度情况。MALDI-TOF-MS等技术能够通过分析质谱图的质量峰强度，快速判断蛋白质样品中是否含有杂质，从而确保实验的精确性和样品的质量。

多肽和蛋白质复合物的分子量测定为其研究提供了必要的数据支持。例如，在药物设计和抗体开发中，蛋白质复合物的精确分子量可以揭示其结构信息，帮助研究人员优化药物设计，提升治疗效果。通过蛋白质分子量测定，科研人员能够深入了解蛋白质复合物的形成过程以及各个组成部分的相互作用。

在生物制药领域，蛋白质的分子量测定对疫苗开发、抗体制备以及重组蛋白的生产具有重要意义。通过精确的分子量测定，可以确保药物分子的一致性与质量，保障生物制品的安全性和有效性。

蛋白质分子量测定在临床诊断中具有广泛的应用，例如在肿瘤标志物的检测、疾病机制的研究以及个性化医疗方案的制定等方面。通过对疾病相关蛋白质的分子量进行精准测定，可以帮助早期诊断，进行疾病预警和精准治疗。

三、如何优化蛋白质分子量测定实验？

为了确保蛋白质分子量测定的准确性和可靠性，实验设计需要细心考虑。以下是一些优化建议：

样品的纯度对分子量测定结果至关重要。样品中杂质可能影响质谱的检测，导致不准确的结果。尽量采用高效的纯化方法，如亲和层析、离子交换层析等，保证蛋白质样品的纯度。

某些化学物质，如表面活性剂（SDS、Triton X-100等）和高浓度盐类，可能干扰质谱分析。在样品制备过程中，应尽量避免使用这些物质，或者通过预处理方法去除它们，以获得清晰的质谱图。

蛋白质样品在处理和运输过程中可能会发生降解或失活，因此需要注意样品的保存条件。冻干样品在运输过程中可以保持稳定，确保实验结果的准确性。对于液体样品，采用干冰运输能够有效降低样品降解的风险。

百泰派克生物科技提供专业的蛋白质分子量测定服务，采用先进的MALDI-TOF-MS技术，为科研人员提供高精度、高效率的蛋白质分析服务。我们的服务覆盖从样品处理、质谱分析到数据解读的全过程，确保为您提供可靠的实验结果。无论您是进行蛋白质鉴定、纯度分析，还是研究多肽和蛋白质复合物，百泰派克都能为您提供定制化的解决方案，助力您的科研工作。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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